ПЛР-ДІАГНОСТИКА НАСІННЄВОГО І РОСЛИННОГО МАТЕРІАЛУ

Відбір зразків насіння відбувається згідно з ДСТУ 4138-2002. Обладнання: конусні, циліндричні, мішкові щупи та механічні пробовідбірники.

Партія насіння — це будь-яка кількість зерна, однорідного за якістю, яку одночасно здають, приймають або зберігають, засвідчена одним документом.

Точкова проба зерна — це проба, відібрана від партії зерна за один раз з одного місця. Об’єднана проба — сукупність усіх точкових проб, узятих з однієї партії.

Середня проба — це частина об’єднаної проби матеріалу, яку передають до лабораторії.

Від кожного відсіку чи бурту відбирають точкові проби у вигляді конверта в п’яти місцях при величині партії до 20 т або 20 м2 поверхні. Якщо поверхня насіння за площею і масою більша за попередньо встановлену, її умовно поділяють на секції, приблизно по 20 м2 кожна, й відбирають від кожної в п’яти місцях.

 Маса середньої проби має становити до 2 кг.

Насіння висипають на роздільну дошку і рівномірно розгортають у вигляді квадрата. За допомогою дерев’яних пластинок (лінійки) розділяють на чотири частини. Дві протилежні частини об’єднують і вказують зазначену інформацію на брендованому пакеті, дві інші відкидаються (зберігаються в господарстві). Виділення середньої проби також можливе при використанні зернового дільника (ДП–5, ДП–10 або інших модифікацій).

Рослинний матеріал соняшнику чи кукурудзи необхідно відбирати від фази BBCH–10 (фаза сходів) до більш пізньої фази BBCH–79 (фізіологічна стиглість). По діагоналі поля з різних рослин на рівній відстані відбирають по 1 листку соняшнику чи кукурудзи. Загальна кількість листків з одного поля повинна становити не менше ніж 50. Листова поверхня має бути цілою та непошкодженою. Також не можна відбирати побурілі, відмерлі (некротизовані) листки, якщо вони є у рослини. Кожен листок (або іншу частину рослини) слід окремо помістити в індивідуальний поліетиленовий чи паперовий пакет або між аркушами м’якого вологоємного паперу. У разі використання інструментів (ножиці, садовий ніж або скальпель) між відборами листків з різних рослин, їх потрібно обробити етиловим спиртом або ж іншим дезінфікуючим засобом. Рослинний матеріал кожного гібрида, що досліджується, необхідно помістити у брендовані пакети «АгроГід», заповнити інформацію на етикетці** й у максимально короткий час надіслати їх до Білоцерківського діагностичного центру.

Схема відбору середньої проби рослинного матеріалу соняшнику та кукурудзи.

** Усі поля етикетки обов'язкові для заповнення. Відповідно до внутрішніх правил діагностичних центрів зразки без заповненої етикетки не беруться у роботу.

Перед відбором зразків рослинного матеріалу слід ретельно оглянути поле і визначити наявність відхилень від нормального розвитку рослин. Рекомендовано зробити знімок досліджуваної місцевості або занотувати дані, а отриману інформацію разом із відібраною пробою передати до діагностичного центру. При відборі проб слід дотримуватися відступів від краю поля, доріг, лісосмуг тощо в 15–20 м. З одного поля в 10-ти різних точках або по діагоналі відібрати в середньому 3–5 рослин. Звертаємо увагу, що кількість і склад зразка залежить від досліджуваної культури (Таблиця 1). Середня проба має містити рослини з нормальним розвитком і уражені / недорозвинуті. Рослини відбираються повністю, прикоренева зона містить не менше ніж 100 г ґрунту. Відібраний матеріал слід упакувати в брендовані пакети «АгроГід»**. Для збереження цілісності при транспортуванні пропонуємо скористатися спеціальним поліетиленовим мішечком для зручної ізоляції кореневої системи.

Щоб відібрати середню пробу, потрібно: Візуально обстежити поле. Встановити відхилення від нормального розвитку рослин і характер поширення (поодиноке, вогнищами, масове). Рекомендовано зробити знімок досліджуваної місцевості або занотувати дані, а отриману інформацію разом з відібраною пробою передати до діагностичного центру. По діагоналі поля в 7–10 точках відібрати проби, відступаючи від краю поля, доріг тощо на 15–20 м, та сформувати середню пробу рослин з нормальним розвитком і таких, які мають візуальні симтоми ураження (в’янення, некрози, плямистості, хлорози, наліт, нарости, деформації, гнилі) (Таблиця 2). Проби рослин у закритому ґрунті відбирають методом «конверта», тобто шляхом відбору точкових проб по краях і в центрі досліджуваної ділянки. При великих площах теплиці використовують систему відбору «подвійного» або «потрійного конверта». Відібраний матеріал слід упакувати в брендовані пакети «АгроГід»**. Для збереження цілісності при транспортуванні пропонуємо скористатися спеціальним поліетиленовим мішечком для зручної ізоляції кореневої системи.

** Усі поля етикетки обов'язкові для заповнення. Відповідно до внутрішніх правил діагностичних центрів зразки без заповненої етикетки не беруться у роботу.

**  за умов однакових симптомів прояву хвороб на полі

Щоб відібрати середню пробу, потрібно: Візуально обстежити площу з насадженням. Встановити відхилення від нормального розвитку рослин і характер поширення (поодиноке, вогнищами, масове). По діагоналі або із суміжних рядів насаджень у 5–7 точках відібрати проби (генеративні й вегетативні органи рослин), відступаючи від краю насаджень, доріг на 20–30 м, і сформувати середню пробу рослин з нормальним розвитком (1–2 рослини запакувати в окремий пакет) і таких які мають візуальні симптоми ураження (в’янення, некрози, плямистості, хлорози, наліт, нарости, деформації, гнилі) (Таблиця 3). Відібрані зразки (з листям або плоди) слід запакувати в окремі пакети та додати абсорбуючий матеріал, наприклад паперові рушники, який поглинатиме рідину або відходи, що можуть утворитися при транспортуванні. Рекомендовано зробити знімок досліджуваної місцевості або занотувати дані, а отриману інформацію разом з відібраною пробою передати до діагностичного центру.